Enhanced BCA Protein Quantification Kit

BCA蛋白濃度測定試劑盒（增強型）

產品關鍵詞：

BSA 牛血清白蛋白；BCA蛋白定量試劑盒；Bradford蛋白定量；Coomassie Brilliant Blue G250 考馬斯亮藍G250；CAS NO：979-88-4；

產品信息

產品描述

BCA法是目前應用比較廣泛的蛋白濃度測定方法。基于雙縮脲反應，即在堿性環境下蛋白質將Cu²⁺還原成Cu⁺，產生一種紫藍色復合物，在562nm處有高的吸光值，該反應產物的量與蛋白濃度成正比。BCA蛋白濃度測定法實現了蛋白濃度測定的簡便、靈敏、快速、穩定和高兼容性。

BCA蛋白濃度測定試劑盒（增強型）與傳統方法比較，具備以下特點：1）靈敏度更高，小檢測蛋白量達到0.2μg，檢測濃度下限達到10μg/ml；2）速度快，比一般的BCA蛋白濃度測定試劑盒顯色所用時間短。3）現性范圍寬，20-1000μg/ml濃度范圍內有較好的線性關系；4）不受絕大部分樣品中化學物質的影響，對于 5%以內的SDS，Triton X-100，Tween 20、60、80具有很好的兼容性。但BCA法受螯合劑和略高濃度的還原劑影響，需確保樣品中EDTA＜10mM，DTT＜1mM，β-ME＜0.01%，以及不含EGTA。

我司提供三種規格的BCA蛋白濃度測定試劑盒（增強型），酶標法分別可做500T，2500T和5000T。

產品組分

使用方法

1.       蛋白標準品的準備

2.       BCA工作液的配制

根據樣品數量，按試劑（A）:試劑（B）=50:1的比例配制BCA工作液，即取50份BCA試劑A和1份BCA試劑B， 充分混勻，即獲得BCA工作液。例如取5ml BCA試劑A和0.1ml BCA試劑B，配制成5.1ml BCA工作液。BCA工作液室溫24小時內穩定。

3.       蛋白濃度的測定

注意事項

1）   蛋白標準BSA粉末溶解于蛋白標準配制液后，即獲得蛋白標準原液，該原液中含有防腐劑，不影響后續檢測，該蛋白標準原液應放在-20℃長期保存。

2）   待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中，否則待測蛋白與蛋白標準所含非蛋白成分不*，有可能導致測定不準確。

3）   待測蛋白和蛋白標準加入BCA工作液后，如果發現檢測效果不佳，可以室溫放置2h或60℃放置30min，顏色會隨著時間的延長不斷加深。顯色反應也會隨溫度升高而加快。如果濃度較低，可以適當延長孵育時間或在較高溫度下孵育。

4）   測定標準曲線時發現隨著標準品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化，可能的原因是樣品中含有嚴重干擾BCA法測定蛋白濃度的物質（詳見資料-BCA法的兼容性）。

5）   建議每次測定都做標準曲線。因為BCA法測定時顏色會隨著時間的延長不斷加深，并且顯色反應的速度和溫度有關，所以除非精確控制顯色反應的時間和溫度，否則如需精確測定宜每次都做標準曲線。

6）   如果沒有酶標儀，也可以使用普通的分光光度計測定，但應考慮根據比色皿的小檢測體積。應按比例適當加大BCA工作液的用量使總體積不小于小檢測體積，樣品和標準品的用量亦相應按比例放大。

7）   為了加快BCA法測定蛋白濃度的速度可以適當加熱，但是切勿過熱，否則易失效。

8）   BCA法檢測樣本中不應含有EGTA，否則影響檢測結果。

9）   為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

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