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產(chǎn)品中心
Y1HGold酵母化學感受態(tài)細胞

Y1HGold酵母化學感受態(tài)細胞

簡要描述:

Y1HGold酵母化學感受態(tài)細胞是Clontech GAL4-AbA酵母單雜交系統(tǒng)用的菌株,MATα型,能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進行文庫篩選。Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用,分別為pAbAi和pGADT7。

產(chǎn)品時間:2025-12-19

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Y1HGold Chemically Competent Cell  

酵母菌化學感受態(tài)細胞


溫馨提示

見我司(懋康生物)整理的酵母雙雜交(Yeast two-hybrid assay產(chǎn)品專題。


產(chǎn)品關鍵詞:

GAL4-AbA酵母單雜交系統(tǒng)Y1HGoldpAbAipGADT7Ar QualX-α-Gal Aureobasidin A AbA);金擔子素;


產(chǎn)品訂購:

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價格(元)

MF2362-1000UL

Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態(tài)細胞

10×100μl

290

MF2362-5000UL

Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態(tài)細胞

50×100μl

1320


產(chǎn)品組分:

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貨號(規(guī)格)

MF2362-1000UL

MF2362-5000UL

MF2362-A

Y1HGold Competent Cell

-80

10×100μl

50×100μl

MF2362-B

pGADT7 Control Vector (10ng/μl)

-80

10μl  

10μl  

MF2362-C

Carrier DNA (5μg/μl)

-20

100μl  

500μl  

MF2362-D

PEG/LiAC Solution

+4

5ml

25ml


產(chǎn)品描述

酵母單雜交是在酵母雙雜交的基礎上發(fā)展起來,不同于雙雜交用來研究蛋白-蛋白間的相互作用,單雜交主要用于研究蛋白和DNA的相互作用。

Y1HGoldClontech GAL4-AbA酵母單雜交系統(tǒng)用的菌株,MATα型,能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進行文庫篩選。

Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用,分別為pAbAipGADT7。前者篩選標志為Ura,用于表達pBait-AbAi構建子(通過將bait-DNA 單拷貝或串聯(lián)重復序列克隆到pAbAi載體所得);后者篩選標志為Leu,用于表達GAL4 AD與誘捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統(tǒng)的工作原理在于:基因組整合有pBait-AbAi的酵母報告菌株,當誘捕蛋白(prey)結(jié)合到誘餌序列(bait-DNA),GAL4 AD會激活AUR1-C報告基因的表達,這一表達使得細胞能夠在含篩選抗生素金擔子素(Aureobasidin AAbA)的培養(yǎng)基上生長。與傳統(tǒng)的營養(yǎng)缺陷報告基因相比,AUR1-CAbAr)在很低濃度(100-200 ng/ml)下即可以有效殺死非抗性克隆,大大降低背景克隆生長。這一優(yōu)勢也可降低酵母單雜交假陽性發(fā)生的概率。

本品為經(jīng)特殊工藝制備的Y1HGold酵母菌化學感受態(tài)細胞,用pGADT7質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>104cfu/μg DNA。且在-80能穩(wěn)定保存三個月。

基因型

MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met-, MEL1

使用方法

  1. 100 µl冰上融化的Y1HGold化學感受態(tài)細胞,依次加入預冷的目的質(zhì)粒2-5 µgCarrier DNA 95-100 孵育5 min,快速冰浴。重復一次。)10 µlPEG/LiAc 500µl,用槍吹打幾次充分混勻,30水浴30 min(在15min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。

  2. 之后將管子放42水浴15 min(在7.5min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。

  3. 5000 rpm離心40s棄上清,用400 µl ddH2O重懸沉淀,離心30s棄上清。

  4. 50 µl ddH2O重懸,涂板,放入恒溫培養(yǎng)箱29培養(yǎng)48-96 h

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名稱

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Minimal SD Agar Base SD瓊脂基礎培養(yǎng)基

467g

MS6312-267G

Minimal SD Base SD基礎培養(yǎng)基

267g

MS6317-10G

DO Supplement -Leu

10g

MS6320-10G

DO Supplement -His/-Leu

10g

MS6334-10G

DO Supplement -Leu/-Met/-Trp

10g

MS6342-10G

DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp

10g

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1ml

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200T


— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】


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Y1HGold酵母化學感受態(tài)細胞

Y1HGold酵母化學感受態(tài)細胞


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